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Enceintes de Sécurité Microbiologique
Généralités, descriptions et spécifications techniques
(Author: P. Herman) (Last revised: March 24, 2006 )

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Les Enceintes de Sécurité Microbiologique (ESM) sont des chambres de manipulation utilisées pour assurer la sécurité du manipulateur et de l'environnement lors de manipulations susceptibles de générer des aérosols infectieux. Elles devraient être conçues afin de satisfaire à des performances et certifiées sur base d'au moins une norme internationale en vigueur (références).

On distingue trois classes d'ESM:

  1. Les ESM de classe I

  2. Les ESM de classe II

  3. Les ESM de classe III

1. ESM de classe I : enceinte de manipulation partiellement ouverte sur le devant et construite de manière à minimiser, grâce à un système d'aspiration créant une dépression, l'échappement d'aérosols générés à l'intérieur de celle-ci. La circulation de l'air est similaire à celle d'une hotte chimique. Toutefois, l'air évacué en partie haute doit être filtré au travers d'au moins un filtre HEPA avant rejet. Le flux d'air entre à une vitesse comprise entre 0,7 et 1 m/s et n'est pas filtré. Ce type d'enceinte assure une protection du manipulateur et de l'environnement mais pas de l'échantillon manipulé. La face frontale est constituée d'une paroi transparente qui délimite une ouverture fixe et comprise entre 20 et 25 cm. L'air sortant peut être rejeté directement dans le laboratoire ou à l'extérieur via un système d'évacuation.

2. ESM de classe II : enceinte de manipulation partiellement ouverte sur le devant, dans laquelle s'écoule verticalement un flux d'air laminaire descendant stérile et construite de manière à minimiser, grâce à une dépression créant un flux d'air entrant en façade ("barrière d'air" ou "veine de garde"), l'échappement d'aérosols générés à l'intérieur de celle-ci. Le courant laminaire d'air qui s'écoule dans le volume de travail est aspiré au voisinage du plan de travail ou au travers de celui-ci lorsqu'il est perforé. L'air sortant en partie haute doit être filtré au travers d'au moins un filtre HEPA et peut être rejeté directement dans le laboratoire ou à l'extérieur via un système d'évacuation. Ce type d'enceinte assure une protection du manipulateur, de l'environnement et de l'échantillon manipulé. La norme européenne relative aux critères de performance pour les postes de sécurité microbiologique (norme EN12469) prévoit des dispositions pour la sécurité environnementale.

Complément d'information: la chambre de manipulation est alimentée par un flux d'air filtré (filtre absolu), uniforme et unidirectionnel, dirigé vers le bas. La laminarité du flux est assurée par la géométrie de la chambre de manipulation et celle de la chambre de surpression en amont du filtre et par une répartition homogène de la vitesse du flux : 0,4 m/s ± 20% en tous points. Le flux est repris dans les bandeaux d'aspiration à l'avant et à l'arrière du plan de travail puis soufflé par le ventilateur dans la chambre de surpression et dirigé vers le filtre de rejet ou à nouveau dans la chambre de manipulation après filtration. L'éclairage est situé en dehors de la chambre afin de ne pas perturber le flux laminaire. La vitesse de l'air laminaire est comprise entre 0,25 et 0,45 m/s (idéalement 0,40 m/s) et celle du flux d'air entrant entre 0,38 et 0,70 m/s (idéalement 0,50 m/s). La face frontale est constituée d'une fenêtre glissante, amovible ou fixe en verre sécurit avec une ouverture de 20 ou 25 cm lors des manipulations. Contrairement aux enceintes de classe I, l'échantillon est protégé des contaminations croisées pouvant venir du volume de travail par le flux laminaire vertical filtré et des contaminations extérieures par le fait que l'air entrant en façade est directement piégé dans des orifices placés en partie avant du plan de travail. Selon le modèle choisi, ces enceintes seront équipées de un ou de deux motoventilateurs et de lampes UV.

Types d'ESM de classe II: type A et B

  • Dans les ESM de type IIA, l'air potentiellement contaminé est transféré vers la partie supérieure et le ventilateur sans filtration. Dans certains dispositifs selon l'emplacement du/des ventilateur(s), le conduit de transfert vers la partie supérieure est sous pression positive des fuites d'air contaminé pourraient donc survenir dans le laboratoire ou dans le volume de travail (conception d'enceinte déconseillée). Dans les autres réalisations, le conduit est sous pression négative et les fuites d'air sont alors évitées.
  • Dans les ESM de type IIB, le conduit  de transfert ne transporte que de l'air filtré et sous pression négative. L'intérêt des ESM de classe II type B réside dans le fait qu'ils permettent la manipulation de substances toxiques volatiles.
3. ESM de classe III : ce type d'ESM fournit la protection la plus élevée pour le personnel et est utilisée pour la manipulation de micro-organismes de classe de risque 4. Toutes les voies de pénétrations sont scellées de manière à les rendre étanches à l'air. L'air entrant est filtré sur filtre HEPA et l'air sortant passe également au travers de filtres HEPA. Le flux d'air est assuré par un système d'évacuation extérieur à l'enceinte, ce qui a pour effet de maintenir une pression de l'air négative à l'intérieur de l'enceinte (200 Pa recommandés par la norme EN 12469). L'accès à la surface de travail se fait au travers de gants épais en caoutchouc qui sont fixés aux orifices de l'enceinte. L'ESM de classe III doit être équipée d'une boîte pouvant passer au travers de l'enceinte. Cette boîte doit pouvoir être stérilisée et est munie d'un filtre HEPA. En l'absence de cette boîte, l'ESM de classe III doit pouvoir être connecté à une autoclave à double entrée de manière à pouvoir décontaminer le matériel entrant et sortant de l'enceinte. Les ESM de classe III conviennent pour les manipulations dans les laboratoires de niveau de confinement 3 et 4.

L'unité de pression dans le système international est le Pascal (Pa). La pression est le témoin du poids d'un fluide (air, eau ou solide). Pour la pression on utilise indifféremment le pascal, le bar et plus rarement le millimètre de mercure. Définition en mécanique des fluides : contrainte qui, agissant sur une surface plane de 1 mètre carré, exerce sur cette surface une force totale de 1 Newton. Pression uniforme qui, agissant sur une surface plane de 1 mètre carré, exerce perpendiculairement à cette surface une force totale de 1 Newton.
  • 1 Pa = 1 Newton/m2
  • 1 millibar (mbar) = 1 hecto pascal (hpa)
  • La pression atmosphérique au niveau de la mer est en moyenne de 1013 mbar ou 760mm de mercure.

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