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Enceintes
de Sécurité Microbiologique
(Author: P. Herman) (Last revised:
February 1, 2007
)
Voici quelques recommandations, basées sur le bon sens, concernant les précautions d'emploi d'une ESM de Classe II, la plus répandue des ESM dans les laboratoires de recherche, les laboratoires de microbiologie et de l'industrie pharmaceutique. Ces recommandations sont présentées dans le tableau 1 sous la forme "Faire/ne pas faire". Cette liste n'est pas exhaustive mais énumère les points cruciaux. Le manipulateur joue un rôle prépondérant dans sa propre protection et celle du matériel biologique qu'il manipule. Ces recommandations ne font pas mention des "bonnes pratiques de laboratoire" ni de la formation du personnel qui sont essentielles mais qui sortent du cadre de ces pages.
Tableau 1 : "Faire/ne pas faire" lors de l'utilisation d'une ESM
| "Faire" | "Ne pas faire" |
|---|---|
| Bien distinguer les différentes classes d'ESM avant toute utilisation |
Ne pas placer de récipient hors de l'ESM pour y déposer les pipettes ou tout autre matériel potentiellement contaminé pendant les manipulations |
| Prendre connaissance du fonctionnement de l'ESM avant son utilisation |
Ne pas obstruer les grilles d'aération avec du papier ou tout autre objet |
| Planifier les manipulations (matériel nécessaire, séquences des manipulations) de manière à éviter les passages de matériel (entrée-sortie) pendant le fonctionnement de l'ESM |
Si l'ESM est équipée de lampes UV: ne pas mettre la(les) lampe(s) UV en fonction pendant l'utilisation de l'ESM |
| Respecter la procédure de mise en fonction et d'arrêt de l'ESM |
Ne pas faire de rapides entrées ou sorties des mains et des avant-bras dans l'enceinte |
| Utiliser un micro-brûleur ou -incinérateur (brûleur de sécurité électronique) plutôt qu'une flamme qui perturbe le flux d'air dans l'enceinte |
Ne pas placer de documents sur la vitre de l'ESM afin de ne pas gêner la vue du manipulateur |
Avant et après les manipulations dans l'ESM, les mains et les avant-bras doivent être lavés avec un détergent germicide |
Ne pas ouvrir ou fermer la porte/fenêtre du laboratoire afin d'éviter les déplacements d'air qui permettrait à des organismes de franchir la barrière d'air du flux dans l'ESM |
| Veiller à laisser les grilles d'aération libres et manipuler au centre de la zone de travail |
Ne pas placer hors de l'ESM du matériel (pipettes, boîtes, flacons, etc.) qui doit être utilisé pendant l'activité projetée |
L'emplacement choisi pour l'ESM est primordial pour assurer son bon fonctionnement. Idéalement l'ESM doit être située à distance des passages et des courants d'air afin de ne pas perturber le flux entrant (0.45 m/s en moyenne). Un espace d'au moins 0.30 mètre est libéré autour de l'ESM (sur les côtés et à l'arrière) pour faciliter l'accès en cas d'entretien. Un espace d'au moins 0.30 à 0.35 m au dessus de l'ESM est requis pour permettre une mesure facile de la vitesse de l'air expulsé ainsi que le changement des filtres d'évacuation.
Le tableau 2 reprend quelques distances minimales conseillées entre: 1) la face frontale de l'ESM et d'autres équipements et 2) entre l'extrémité de l'ESM et un obstacle.
Tableau 2 : distances minimales conseillées
| Entre la face frontale de l'ESM et: | Entre l'extrémité de l'ESM et: |
|---|---|
un passage habituel: 1 m |
un mur ou un obstacle perpendiculaire à l'ESM: 0.30 m |
un "bench" parallèle à l'ESM: 1.5 m |
un pilier placé devant la face frontale de l'ESM: 0.30 m |
un mur opposé (ou tout autre obstacle): 2 m |
une porte dans un mur parallèle à l'ESM: 1 m |
une porte dans un mur perpendiculaire à l'ESM: 1.5 m |
|
la face frontale d'une autre ESM: 3 m |
Les effets de la ventilation du local (air conditionné, mouvement de l'air) sur le fonctionnement d'une ESM et les turbulences engendrées dans les ESM ont été étudiés (voir références, Rake BW, 1978 , Clarck RP, 1990).
Il est conseillé de limiter toutes les autres activités dans le local pendant l'utilisation de l'ESM. Ces activités pourraient pertuber l'écoulement d'air dans l'ESM.
Procédure
de mise en fonction et d'arrêt de l'ESM
L'ESM ne doit pas nécessairement être mis en fonction 24h/24, cette pratique peut réduire la durée de vie des filtres HEPA.
Avant d'utiliser l'ESM
- Si l'ESM en est équipé, vérifier que les lampes UV sont éteintes;
- Mise en fonction 15/20 minutes avant toute manipulation;
- S'assurer qu'aucun objet n'obstrue les grilles d'aération;
- Si l'ESM est équipé d'une alarme, mettre cette alarme en fonction;
- Désinfecter les surfaces intérieures de l'ESM;
- Placer le matériel qui sera nécessaire à la manipulation;
- Si nécessaire, séparer le matériel "sale" du matériel "propre"
Arrêt de l'ESM en fin de manipulation
- Fermer les tubes, flacons et boîtes avant de les sortir de l'ESM;
- Désinfecter la surface des objets présents dans l'enceinte avant de les sortir;
- Désinfecter les surfaces intérieures de l'ESM;
- Laisser encore l'ESM en fonction 5/10 minutes avant son arrêt.
Maintenance
et "certification"
Un attention particulière doit être portée au remplacement des filtres HEPA et/ou des préfiltres. Cette opération est effectuée à la suite d'une alarme (si l'ESM en est équipée) ou d'une perte de charge du filtre concerné (mesure à l'aide d'un manomètre). Si l'assemblage des filtres prévu par le constructeur ne garantit pas la sécurité du personnel, le changement des filtres doit être précédé d'une fumigation.
Un contrôle "périodique" de l'ESM par le fabriquant ou une société spécialisée est recommandé. Le plus souvent ce contrôle consiste en une visualisation de l'écoulement dans l'ouverture de l'enceinte et en une mesure de vitesse et de la "propreté" de l'air dans le flux d'air descendant. Il est conseillé de faire contrôler les critères de performance de l'ESM définis dans la norme EN 12469 sur une base annuelle.
Toute réparation sur une ESM doit être réalisée par du personnel technique qualifié. Tous les dysfonctionnements ou anomalies constatés doivent être rapportés au responsable du laboratoire et doivent faire l'objet d'une réparation avant toute utilisation subséquente de l'ESM.
Déversements
accidentels ("Spills")
Quand un déversement accidentel survient dans une ESM la décontamination doit être assurée immédiatement pendant que l'ESM est toujours en fonction. Un désinfectant approprié doit être appliqué sur la surface de travail de manière à minimiser la formation d'aérosols infectieux. Tout le matériel qui est entré en contact avec le liquide répandu dans l'ESM doit être désinfecté ou autoclavé. Du papier absorbant est disponible à proximité de l'ESM ("Spill Kit").
Le matériel nécessaire à la décontamination et une procédure écrite doivent être à la disposition du personnel de laboratoire.
La surface de tous les éléments présents dans l'ESM doit être décontaminée quand une manipulation est terminée (la présence de milieu de culture résiduel peut servir de support à la croissance bactérienne). Les surfaces intérieures de l'ESM sont désinfectées avant et après chaque utilisation. Une solution d'eau de javel ou préférablement d'éthanol à 70% peut être utilisée. Un passage à l'eau stérile est nécessaire après l'application du désinfectant si celui-ci est corrosif.
Remarque: l'usage de désinfectants tels que des solutions à base de phénol, des amoniums quaternaires ou des aldéhydes sont recommandés par la norme EN 12469 pour les surfaces.
Il est recommandé de maintenir l'ESM en fonction pendant la désinfection. L'ESM est éteint au minimum 5 minutes après la désinfection de manière à "purger" l'atmosphère de l'enceinte.
L'ESM doit être décontaminée :
- avant le changement de filtre(s) (et éventuellement pré-filtre) ;
- avant la recherche de fuites autour des filtres ;
- après un déplacement de celle-ci dans le même local ou dans un autre laboratoire ;
- après contact de matériel biologique infectieux sur des surfaces inaccessibles.
La méthode de décontamination la plus commune est la fumigation aux vapeurs de formaldéhyde. La décontamination de l'ESM par cette méthode doit être réalisée par du personnel technique qualifié. La fumigation est utile pour décontaminer les parties difficilement accessibles par les méthodes manuelles. Des recommandations sur la procédure de fumigation et les raisons pour lesquelles elle doit être effectuée sont définies dans la norme EN 12469.
Equipement
de protection individuel
Un équipement de protection individuel doit être porté même lors de l'utilisation d'une ESM. Le tablier de laboratoire sera adapté à la situation et au niveau de confinement du laboratoire. Les gants seront portés de manière à ce que l'extrémité de la manche soit dans le gant et non l'inverse. Dans certains cas le port d'un masque et/ou de lunettes de protection peut être exigé.
Deux types d'alarme peuvent équiper l'ESM. Une alarme qui prévient le manipulateur lorsque la position de la vitre frontale de l'ESM est mal postionnée. Il suffit de placer la vitre correctement pour que l'alarme cesse. L'autre alarme prévient le manipulateur en cas de dysfonctionnement de la circulation de l'air dans l'enceinte. Dans ce cas, le manipulateur est en danger et le travail en cours doit être interrompu immédiatement. L'incident est rapporté au responsable du laboratoire.
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